JP3424049B2 - Bone formation implant - Google Patents

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は、骨形成用移植体に関す
る。特には、二相性リン酸カルシウムからなる担体に骨
誘導因子を担持してなる骨形成用移植体に関する。 【０００２】 【従来の技術】骨誘導因子（ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇ
ｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ：ＢＭＰ）は、皮下組織
又は筋組織内の未分化間葉系細胞に作用して、これを軟
骨芽細胞又は骨芽細胞に分化させ、軟骨又は骨を形成さ
せる活性タンパク質である。ＢＭＰは、ウシ脱灰骨基質
中に存在する異所性骨誘導活性を示す物質として発見さ
れたが、純粋に単離されず、具体的な構造は未解明のま
まであった。しかし、遺伝子工学の技術により、ヒトＢ
ＭＰをコードする遺伝子がクローニングされ、アミノ酸
配列が明らかになった。また、ヒトＢＭＰは、アミノ酸
配列が相同性を有する複数の近縁タンパク質からなる一
群のファミリーを構成することも判明し、多数の種類の
組換えヒト骨誘導因子（ｒｈＢＭＰ）が創製されてきた
〔Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｖｏｌ．２４２，ｐｐ．１５２８−
１５３４（１９８８）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ Ｖｏｌ．８７，ｐｐ．２２２０−
２２２４（１９９０）；Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｇｒ
ｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．
１，ｐｐ．２６７−２８０（１９８９）；特表平２−５
００２４１号、特表平３−５０３６４９号、特表平３−
５０５０９８号、ＷＯ９１／１８０９８、ＷＯ９２／０
５１９９、ＷＯ９３／０９２２９の各公報〕。また、形
質転換体による生産も行われている。 【０００３】前記のＢＭＰを利用して、骨又は軟骨の損
傷、欠損あるいは形成不全等の治療を行う方法は、その
ＢＭＰの構造が未解明であった頃から種々提案されてお
り、組換えヒトＢＭＰの生産に伴って更に盛んになって
いる。ＢＭＰを利用する際には、ＢＭＰを単独で局所に
埋植して骨形成を誘導させることが極めて困難であるの
で、一般的には、ＢＭＰを担体に担持させた形で局所に
埋植する。これは、ＢＭＰによる局所での骨誘導には数
日ないし数週間が必要であり、少なくともその間にＢＭ
Ｐを拡散させずにその局所に留めることが主要な目的で
ある。このように、ＢＭＰ用担体はＢＭＰと共に生体内
に埋植されるので、ＢＭＰ活性を損なわずに、低毒性、
低発癌性及び低抗原性等の特性を有することが要求さ
れ、更に入手容易性や、場合により生分解性を有するこ
とも望まれる。既に提案されている技術としては、例え
ば、セラミックス材料支持体にＢＭＰとコラーゲン担体
とを含浸させた移植体（特開昭６０−２５３４５５号公
報）や、ｒｈＢＭＰと多孔性生体分解性ポリマーと自家
血とからなる組成物（アメリカ特許第５，１７１，５７
９号明細書）等がある。しかし，これらの移植体は抗原
性等の安全性、手術時の操作性、整形性等の点で更に改
善が望まれるものであった。 【０００４】一方、歯や骨の欠損部分を補填する無機焼
結体として、二相性リン酸カルシウム（Ｂｉｐｈａｓｉ
ｃ Ｃａｌｃｉｕｍ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ＢＣＰ）を
用いることが知られていた〔特開平３−９４７６１号公
報；歯科ジャーナル，３６（２）：１６７−１７７，１
９９２〕。ＢＣＰは、ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）と
β−トリカルシウムホスフェート（β−ＴＣＰ）との焼
結体である。その結晶構造はＸ線解析パターンによって
ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）相とβ−トリカルシウム
ホスフェート（β−ＴＣＰ）相との混合体であることも
確認されており、更に、ヒドロキシアパタイトとβ−ト
リカルシウムホスフェートとの混合比を調節して種々の
ＢＣＰを調製することができる。前記の特開平３−９４
７６１号公報は、ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）とβ−
トリカルシウムホスフェート（β−ＴＣＰ）との重量比
が２：８〜８：２で、両者の合計が９０重量％以上であ
る顆粒状焼結体・ＢＣＰが、充分な生体親和性と、骨と
の活発な置換作用を有していることを記載している。し
かし、ＢＣＰ補填補綴材を用いると骨形成の立ち上がり
がかなり遅く、初期段階ではＢＣＰ補填補綴材を用いて
いないコントロール試験よりも骨形成量が逆に少なくな
る（前記の歯科ジャーナル）。従って、充分な骨形成を
得るには長期間を必要とするという欠点があった。な
お、このＢＣＰをＢＭＰの担体として用いることは従来
全く知られていなかった。むしろ、ＢＣＰの構成成分で
あるヒドロキシアパタイトにＢＭＰを担持させても、Ｂ
ＭＰが急速に拡散して骨誘導が生じないことが報告され
ていた（Ｔａｋａｏｋａ，ｅｔ ａｌ，Ｃｌｉｎ．Ｏｒ
ｔｈｏｐ．２３４：２５０−２５４，１９８８）。 【０００５】 【発明が解決しようとする課題】本発明者は、ＢＭＰ用
担体として求められる前記の特性を有し、しかも適応時
の操作性や整形性に優れた担体に関する研究を行ったと
ころ、従来はＢＭＰ用担体として使用されたことのない
ＢＣＰが極めて優れた担体であると共に、ＢＣＰ上にＢ
ＭＰを担持してなる骨形成用移植体は生体内で速やかに
骨形成を誘導することができることを見出した。この点
は、ヒドロキシアパタイトとＢＭＰとの組み合わせでは
骨誘導が生じないとする従来の知見から判断すると、驚
くべきことである。従って、本発明の目的は、生体内で
速やかに骨形成を誘導し、しかも新生骨に徐々に置換
し、移植体の残存が無いか或は最小限に抑えられた、良
好な骨組織を形成し得る移植体であって、抗原性等の点
で安全で、しかも適応時の操作性、整形性に優れた骨形
成用移植体を提供することにある。 【０００６】 【課題を解決するための手段】前記の目的は、本発明に
よる、 （１）ヒト骨誘導因子をコードする塩基配列を含む組換
えＤＮＡを含有する形質転換体によって産生された組換
えヒト骨誘導因子（ｒｈＢＭＰ）と、 （２）ヒドロキシアパタイトとβ−トリカルシウムホス
フェートとを合計で９０重量％以上含み、ヒドロキシア
パタイトとβ−トリカルシウムホスフェートとの重量比
が３０：７０〜１０：９０である二相性リン酸カルシウ
ム（ＢＣＰ）とを含み、実質的にコラーゲンを含まない
ことを特徴とする、骨形成用移植体によって達成するこ
とができる。 【０００７】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の
移植体は、主に生体内で骨（軟骨を含む）を形成すべき
部位に移植して使用する。本発明の移植体を生体内に移
植すると、埋植した局所でＢＭＰが作用して骨形成を誘
発する。ＢＣＰは、このＢＭＰを局所に留め、望ましい
形態の骨を形成させるデリバリー・システムの役割を果
たしながら、それ自体も徐々に生体内で吸収を受け、新
生骨に置換される。ＢＣＰは、ヒドロキシアパタイト相
に由来する骨伝導能とβ−トリカルシウムホスフェート
相に由来する生体内吸収性を併せもち、ＢＭＰに骨形成
の場を与え、骨誘導能を有効に発現させると共に、徐々
に新生骨と置換されることにより、その後の残存する移
植体に起因する感染症等の影響を受けにくい生体由来の
既存の骨と同等の良好な骨組織を形成させる。また、Ｂ
ＣＰは、それ自体免疫反応を生じない安全性の高い担体
であると同時に、ＢＭＰの担体としてコラーゲン等と組
み合わせなくても骨形成を誘導することができ、安全性
の上で有利である。更に、ＢＣＰはその多孔性の性状に
より、ＢＭＰの担持性が良好であると共に、ＢＭＰにそ
の骨形成に好適な微小環境を付与する点で有利である。
また、本発明の移植体は手術時の調製が容易であり、操
作性及び整形性にも優れている。 【０００８】本発明で使用することのできる骨誘導因子
（ＢＭＰ）は、未分化の間葉系細胞に作用して、これを
軟骨細胞や骨芽細胞へ分化させ、軟骨又は骨を形成させ
る活性を有するタンパク質であり、免疫性等の臨床上の
安全性及び品質の安定した材料を大量に入手することが
できる点で遺伝子組換え技術により製造されたヒトＢＭ
Ｐである。すなわち、ヒト骨誘導因子をコードする塩基
配列を含む組換えＤＮＡを含有する形質転換体（細胞又
は微生物）を培養し、それら形質転換体によって産生さ
れた組換えヒト骨誘導因子を単離、精製して調製した組
換えヒト骨誘導因子（ｒｈＢＭＰ）である。これらのヒ
ト骨誘導因子（ｒｈＢＭＰ）としては、例えば、ｒｈＢ
ＭＰ−２、ｒｈＢＭＰ−３、ｒｈＢＭＰ−４（ｒｈＢＭ
Ｐ−２Ｂともいう）、ｒｈＢＭＰ−５、ｒｈＢＭＰ−
６、ｒｈＢＭＰ−７、ｒｈＢＭＰ−８、ｒｈＢＭＰのヘ
テロダイマー又はこれらの改変体や一部欠損体を挙げる
ことができる。これらのタンパク質を単独で又は２種以
上の混合物として用いることができる。 【０００９】これらのｒｈＢＭＰは、哺乳動物細胞（例
えば、ＣＨＯ細胞）、微生物（例えば、大腸菌）又は酵
母細胞等で発現したものであることができる。既に大量
生産法及び精製法が確立しているｒｈＢＭＰとしてはｒ
ｈＢＭＰ−２があるが、その他のｒｈＢＭＰを同様に製
造し、精製して用いることができる〔Ｐｒｏｇｒｅｓｓ
ｉｎ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃ
ｈ，Ｖｏｌ．１，ｐｐ．２６７−２８０（１９８
９）〕。既に知られている精製ｒｈＢＭＰ−２は、Ｎ末
端アミノ酸配列が異なる複数の単量体からなる成熟ペプ
チドであって、分子量約３０，０００の二量体タンパク
質である。それぞれの単量体は、Ａｓｎ⁵⁶残基にハイ・
マンノース型の糖鎖を有している〔Ａｂｓｔｒａｃｔ
Ｓｉｘｔｈ Ｉｎｔｅｒｒａｃｔｉｏｎ Ｓｙｍｐｏｓ
ｉｕｍ ｏｆ ｔｈｅ ＰｒｏｔｅｉｎＳｏｃｉｅｔ
ｙ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９２）〕。 【００１０】本発明で使用することのできる二相性リン
酸カルシウム（ＢＣＰ）は、ヒドロキシアパタイトとβ
−トリカルシウムホスフェートとを合計で９０重量％以
上含むＢＣＰであり、生体親和性が良好である。ヒドロ
キシアパタイトは、本来的に良好な骨伝導能を有してい
るが、生体内では吸収されにくい。一方、β−トリカル
シウムホスフェートは、骨伝導能は低いが生体内で吸収
される。従って、ヒドロキシアパタイトとβ−トリカル
シウムホスフェートとの構成比を変化させることによ
り、前記のとおり、ＢＣＰの骨伝導性と生体内吸収性と
を適切に調節することができる。 【００１１】本発明の移植体で用いるＢＣＰは、ヒドロ
キシアパタイトの骨伝導性を維持しつつ、しかもＢＭＰ
によって誘導される新生骨と良好に置換する程度の吸収
性を有していることが好ましい。こうした好ましい特性
を有するＢＣＰでは、ヒドロキシアパタイト／β−トリ
カルシウムホスフェート比（重量）が、３０／７０ない
し１０／９０の範囲内にある。ヒドロキシアパタイト／
β−トリカルシウムホスフェート重量比が約３０／７０
以下になると移植されたＢＣＰの大部分が生体内で吸収
され、更に約２０／８０以下では完全に生体内で吸収さ
れるので特に好ましい。前記の重量比が５０／５０を超
えると新生骨内部のヒドロキシアパタイトの残留量が増
加し、リモデリング等による骨吸収や感染症の原因とな
り、一方、１０／９０未満になるとヒドロキシアパタイ
トの骨伝導能が不十分となるので好ましくない。 【００１２】ＢＣＰは、公知の方法で調製することがで
きる（特公昭６０−２５３８３号、特公昭６０−５０７
４４号、特開平３−９４７６１号、特開平３−１３７０
７９号、特開平４−２３５５号、特開平５−１１７０５
６号又は特開平５−１６１７０７号各公報）。例えば、
ヒドロキシアパタイトとβ−トリカルシウムホスフェー
トとを約１１００〜１２００℃の焼成段階で混合させて
調製する。 【００１３】前記の方法により、ＢＣＰは、通常は多孔
質顆粒体として調製される。この多孔質顆粒状ＢＣＰを
そのまま本発明移植体の担体として用いることができ
る。顆粒状担体の大きさは特に制限されないが、移植体
を調製及び移植する際の操作性や適応性の点から、好ま
しくは約５ｍｍ以下、より好ましくは１００〜１０００
μｍ、特に好ましくは４００〜６００μｍである。ま
た、多孔質顆粒状担体の比表面積も特に制限されない
が、ＢＭＰの担持効率や骨形成の場を提供する点から、
好ましくは約０．３ｍ² ／ｇ以上、より好ましくは０．
５〜１．０ｍ² ／ｇ、特に好ましくは０．７〜０．８ｍ
² ／ｇである。 【００１４】ＢＣＰを、所定の形状を有する多孔質ブロ
ック状成形体として得ることもでき、この多孔質ブロッ
ク状成形体を本発明移植体の担体として用いることがで
きる。多孔質ブロック状成形体は、公知の方法で、前記
のヒドロキシアパタイトとβ−トリカルシウムホスフェ
ートとから焼成により直接成形するか、又は顆粒状ＢＣ
Ｐを再焼成して調製することができる。この多孔質ブロ
ック状成形体は、調製時に形状を調整するだけでなく、
成形後（特に、移植時）にも簡単に所望の形状に変える
ことができる。多孔質ブロック状成形体の大きさや形状
は移植部位や移植目的に応じて適宜調整すればよい。ま
た、比表面積も特に限定されないが、前記の多孔質顆粒
体と同様の理由で、前記と同様の範囲であるのが好まし
い。 【００１５】前記のＢＣＰ担体にＢＭＰを担持させて、
本発明の移植体を調製する方法は特に制限されるもので
はなく、例えば、適当な液体中のＢＭＰ溶液（又は懸濁
液）をＢＣＰ担体に浸漬、含浸、噴霧、塗布又は滴下等
の方法により添加し、続いて、乾燥（好ましくは減圧又
は凍結乾燥）して容易に所望の移植体を得ることができ
る。好適には減圧下に含浸させた後に凍結乾燥する。い
ずれの場合も、ＢＭＰの活性を失わせることなく、ＢＣ
Ｐの多孔質部分の全体にＢＭＰをほぼ均一に分散させる
ことのできる方法が好ましい。こうして、多孔質顆粒状
担体からは多孔質顆粒状移植体を得ることができ、多孔
質ブロック状担体からは多孔質ブロック状移植体を得る
ことができる。更に、前記の多孔質顆粒状移植体の一群
を、生体内で数時間若しくは数日以内に迅速に分解する
生体適合性の適当な容器、例えば、カプセル（例えば、
ゼラチンカプセル、ソフトカプセル等）、袋状のシート
（例えばゼラチン膜）に収納して、あるいは同様の生体
分解性シート等に包んで、手術時の操作性に優れるパッ
ケージ移植体とすることもできる。 【００１６】更に、本発明の移植体は、前記の多孔質顆
粒状ＢＣＰにＢＭＰを付与する前、後又は同時に増粘剤
を加え、所望の形状に成形した固体、半固体、粘土状、
ペースト状、又は高粘性流動体の凝集体であることもで
きる。増粘剤としては、生体適合性、安全性、及び好ま
しくは生体分解性を有し、顆粒状ＢＣＰと共に所望の凝
集体を成形することのできるものである限り特に制限は
ないが、例えば、セルロース系高分子化合物、例えばヒ
ドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルセルロース又はカルボキシメチルセルロース；ポリ乳
酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＬＧ）、又はこれ
らのコポリマー（ＰＬＧＡ）；ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポ
リグリコール酸（ＰＬＧ）又はこれらのコポリマー（Ｐ
ＬＧＡ）とポリエチレングリコール（ＰＥＧ）とのコポ
リマー；ヒアルロン酸；アルギン酸；ゼラチン；又はフ
ィブリン糊等を挙げることができる。 【００１７】前記の多孔質顆粒状担体に増粘剤を加える
方法も特に制限されるものではなく、例えば、前記のＢ
ＭＰの担持方法と同様に、適当な液体中の増粘剤溶液
（又は懸濁液）を担体に浸漬、含浸、噴霧、塗布又は滴
下等の方法により添加し、続いて、乾燥（好ましくは減
圧又は凍結乾燥）すればよい。好適には減圧下で含浸さ
せた後に凍結乾燥する。いずれの場合も、ＢＭＰの活性
を失わせることなく、ＢＣＰの多孔質部分の全体に増粘
剤をほぼ均一に分散させることのできる方法が好まし
い。こうして、本発明による凝集体状移植体を得ること
ができる。 【００１８】移植体のＢＭＰの担持量は、骨形成を引き
起こすのに必要最小限のＢＭＰ濃度（最小骨形成発現濃
度）より多ければよい。ＢＭＰ濃度の増加にともなって
骨形成量は増加するが、ある値以上では骨形成量はほぼ
一定となる。一般にこの骨形成量は、移植体の大きさ
（又は顆粒状移植体群の占める体積）にほぼ一致する。
すなわち、過度に濃度を増加しても移植体の大きさ以上
の骨は形成されない。 【００１９】適当な濃度のＢＭＰを含んだ移植体を埋植
して形成される骨の大きさと形状は、移植体の大きさ及
び形状に原則として依存する。従って、具体的な混合比
やＢＭＰ濃度は、ＢＣＰの種類、形状、多孔性の程度、
移植体の適用部位、好ましい骨形成速度等に応じて適宜
決定することができる。例えば、顆粒状ＢＣＰ担体とｒ
ｈＢＭＰ−２を用いて本発明移植体を調製する場合に
は、ｒｈＢＭＰ−２を１μｇ／形成すべき骨又は軟骨の
容量１ｍｌ以上、好ましくは５〜１、０００μｇ／同１
ｍｌ、より好ましくは１０〜３００μｇ／同１ｍｌの量
で担持させるのが好ましい。 【００２０】本発明の移植体は、前記以外の成分を含有
することができる。それらの所望成分として、具体的に
は、安定化剤、保存剤、可溶化剤、ｐＨ調整剤又は増粘
剤等を挙げることができる。また、骨又は軟骨形成に有
用な追加成分、例えば、リン酸カルシウム、ヒドロキシ
アパタイト等のミネラル成分、骨若しくは軟骨形成補助
因子等の作用促進成分、フィブロネクチン、オステオネ
クチン、又は非抗原性のＩＢＭ（不溶性骨マトリック
ス）等を含むこともできる。これらの所望成分は、本発
明移植体を製造する好適な段階で、適宜に好適な方法に
より添加することができる。 【００２１】本発明の移植体は、使用時に調製されても
よく、あるいは調製後使用時まで適切な条件下で保存さ
れてもよい。本発明の移植体は、各種の骨又は軟骨の欠
損を修復するために、当該分野に知られた方法で、患部
に移植することができる。すなわち、従来知られている
移植体と同様に、生体に適用することができ、その目
的、用途、適応部位、患者の状態等に応じて、当業者の
常法に従って適宜適用することができる。 【００２２】本発明の移植体は、前記のように形成され
る新生骨の形状を実質的に規定する。すなわち、その移
植体の形状に対応して骨形成が生じる。具体的には、本
発明移植体が埋植された部位において、移植体周囲に集
まったマクロファージによりＢＣＰが徐々に貪食吸収さ
れ、ＢＭＰにより誘導された新生骨に置換される。従っ
て、骨形成を期待する形状に沿って、本発明の移植体を
成形することが望ましい。また、本発明の移植体は、移
植手術後の取り出し手術の必要がない。 【００２３】本発明による前記の各種の移植体は、それ
を単独で用いるだけでなく、それらを任意に組み合わせ
て用いてもよい。また、本発明移植体と別の公知移植体
とを組み合わせて用いてもよい。例えば、人工インプラ
ント材料の周囲に、本発明による顆粒状移植体及び／又
はブロック状移植体を付着させて移植することができ
る。特に歯科領域の適用においては、本発明による顆粒
状移植体とＧＴＲ法の併用が効果的である。更に、人工
歯根を埋植する際に、骨穿孔部との接触部に本発明移植
体を付着させることも有効である。本発明移植体の局所
への固定、形状の維持あるいは強度が十分でない場合に
は、他の公知の補強材を併用することもできる。補強材
は、例えば、移植体を固定するための生体適合性の膜、
例えばコラーゲン膜やＧＴＲ法に用いるゴアテックス膜
又はポリ乳酸膜等、あるいは本発明移植体と生体内組織
（特に骨）との固定具、例えば金属プレート、骨結合用
ピン又は固定釘等であり、これらの補強材は、必要があ
れば、骨形成後に、外科的に取り除くこともできる。ま
た、他の公知の移植体と併用して用いてもよい。 【００２４】 【実施例】以下、実施例によって本発明を更に具体的に
説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものでは
ない。実施例１ （１）移植体の調製 ＢＣＰ担体としては、β−トリカルシウムホスフェート
８０％とヒドロキシアパタイト２０％とを焼成段階（焼
成温度１１５０℃）で混合させて製造した顆粒状ＢＣＰ
（粒径：４２０〜５９０μｍ；比重：３．１；比表面
積：０．０７６ｍ² ／ｇ；日本特殊陶業ＫＫ製）を用
い、ＢＭＰとしては、山之内製薬より提供されたｒｈＢ
ＭＰ−２のアルギニン（０．５Ｍ）／Ｌ−ヒスチジン
（１０ｍＭ）水溶液（ｐＨ６．５）を用いた。ＢＣＰ顆
粒約７００μｌを、ｒｈＢＭＰ−２水溶液（ｒｈＢＭＰ
−２の配合量：５０μｇ及び１０μｇ）に減圧下で約１
時間浸漬させた後、凍結乾燥を行い顆粒状移植体を得
た。この２種類の移植体をゼラチンカプセルに入れて、
移植試験実施時まで−２０℃で保存した。 【００２５】（２）骨形成試験 Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（７週齢）（各群５匹）の背
部に皮膚切開を入れ、皮下の疎性結合組織内に、前記
（１）で調製した移植体の入ったカプセルを移植埋入し
た。コントロールとしては、ｒｈＢＭＰ−２を担持して
いないＢＣＰ顆粒のみを封入して含むカプセルを同様に
移植した。移植から３週間経過後、背部皮膚を丁寧に剥
離し、移植物を一塊として取り出し、直ちにホルマリン
固定を行い、その後、Ｘ線撮影を行った。通法に従って
脱灰パラフィン切片を作製し、ヘマトキシリン・エオジ
ン染色を施して、光学顕微鏡にて観察した。 【００２６】（３）結果 ｒｈＢＭＰ−２を５０μｇ配合した移植体を埋植した群
では５例全例において、骨様組織の形成が観察された。
骨様組織のほとんどの場合は、細胞を中心に球状に形成
された小さな骨様組織の集団と、その集団に連続した層
板様構造を有する新生骨組織として観察された。この１
例の顕微鏡写真を図１に示す。ｒｈＢＭＰ−２を１０μ
ｇ配合した移植体を埋植した群では５例中１例におい
て、一部のＢＣＰ顆粒中央部に上記と同様の骨様組織の
形成が見られたが、他の４例においては明らかな骨様組
織の形成は認められなかった。コントロール群において
は、明らかな骨様組織の形成は認められず、ＢＣＰ顆粒
内に多数の細胞が、ＢＣＰ顆粒周囲に多核の巨細胞が観
察された。上記試験で、主に顆粒中央部に、小さな骨様
組織の集団が観察され、その集団のいくつかに連続した
顆粒間相当部に比較的分化した新生骨組織が観察された
ことから、本発明の多孔質移植体を移植した場合、最初
に小さな球形の骨様組織が移植体内部に形成され、その
後、周囲にさらに分化した骨組織が形成されたと考えら
れる。上記の異所性骨誘導モデルにおいて、移植からわ
ずか３週間で上記のような骨形成が観察され、しかも生
体内で低炎症であることが確認された。従って、本発明
移植体は、生体内で速やかに骨形成を誘導し、しかも新
生骨に徐々に置換し、移植体の残存を完全に無くすかあ
るいは最小限に抑えることができ、良好な骨組織を形成
することができ、しかも抗原性等の点で安全であること
が示された。なお、実施例１（１）で調製した顆粒状移
植体を、歯周病によって生じた歯槽骨の欠損部に補填し
て適用することもできる。更に、ＧＴＲ法を併用して前
記の顆粒状移植体を固定してもよい。 【００２７】実施例２ （１）移植を行う骨欠損の形状に合わせて成形した円柱
状の多孔質ＢＣＰブロックに、ｒｈＢＭＰ−２のアルギ
ニン（０．５Ｍ）−Ｌ−ヒスチジン（１０ｍＭ）水溶液
（ｐＨ６．５）を、ｒｈＢＭＰ−２の１００μｇ／ＢＣ
Ｐブロック１ｍｌの量で減圧下に浸漬させ、続いて凍結
乾燥を行い、ブロック状移植体を調製する。こうして得
られたブロック状移植体を、骨欠損部に補填して適用す
ることができ、更にこのブロック状移植体と残存骨とを
金属プレートで固定してもよい。 （２）実施例１（１）と同様のＢＣＰ顆粒に、ｒｈＢＭ
Ｐ−２を含む水溶液を浸漬させ、乾燥させた後に、粘性
のあるポリ乳酸（分子量６５０）−ポリエチレングリコ
ール（分子量２００）ブロック共重合体（ＰＬＡ−ＰＥ
Ｇ）を加えて、高粘性ゲル状移植体を調製する。 （３）ＰＬＡ−ＰＥＧに代えてカルボキシメチルセルロ
ースを用いること以外は前記実施例２（２）と同様の操
作により、粘土状の移植体を調製する。 【００２８】 【発明の効果】本発明移植体は、生体内で速やかに骨形
成を誘導し、しかも新生骨に徐々に置換し、移植体の残
存を完全に無くするかあるいは最小限に抑え、良好な骨
組織を形成することができ、抗原性等の点で安全で、し
かも適応時の操作性及び整形性にも優れている。従っ
て、外傷、疾病又は先天性の欠陥等によって引き起こさ
れた各種の骨又は軟骨の欠損を修復するために、当該分
野に知られた方法で患部に適用することができる。本発
明移植体は生体内に移植された際に、起炎性が低く生体
適合性に優れている。また、新生される骨と生体内の既
存の骨との連続性も良好であり、自然に近い状態で骨又
は軟骨の修復が可能になる。本発明移植体は、各種の分
野に適用することができ、例えば、骨折等の外傷、腫瘍
あるいは炎症性、変性ないし壊死性骨疾患等の疾患、脳
外科あるいは整形外科手術等の手術に伴う採骨等による
骨又は軟骨の欠損部位の修復、各種骨折の治癒促進、人
工関節、人工骨若しくは人工歯根等の人工インプラント
周囲での骨の形成、人工インプラント使用時の固着促
進、脊椎固定促進、脚延長等の整形外科分野における骨
の補填、軟骨の再生、関節の再建、形成外科分野での骨
又は軟骨の補填、あるいは歯科領域での骨、軟骨又はセ
メント質の修復やインプラント使用のための骨の増大等
に好適である。 【００２９】本発明移植体のうち、顆粒状移植体及び凝
集体移植体は、特に骨又は軟骨の小規模な欠損の修復、
各種骨折の治癒促進、あるいは歯科領域における骨、軟
骨又はセメント質の修復やインプラント使用のための骨
の補充等、移植体の固定が容易な骨（軟骨）欠損に対し
て有用性が高い、一方、大規模な骨欠損、一定の強度を
必要とする部位、あるいは特定の形状の維持が必要とさ
れる部位における骨欠損に対しては、成形されたブロッ
ク状移植体を用いるのが有利である。Description: BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to an osteogenic implant.
You. In particular, bone is used as a carrier consisting of biphasic calcium phosphate.
The present invention relates to an osteogenic implant carrying an inducing factor. [0002] Bone morphogen
enetic protein (BMP) is a subcutaneous tissue
Alternatively, it acts on undifferentiated mesenchymal cells in muscle tissue and softens them.
Differentiate into osteoblasts or osteoblasts to form cartilage or bone
Active protein. BMP is bovine decalcified bone matrix
Found as a substance with ectopic osteoinductive activity
However, it was not isolated purely, and the specific structure remains unknown.
Up to. However, due to genetic engineering technology, human B
The gene encoding MP has been cloned and
The sequence was revealed. Human BMP is an amino acid
A sequence consisting of multiple closely related proteins with homologous sequences
It has also been found that they form a family of groups,
Recombinant human osteoinductive factor (rhBMP) has been created
[Science Vol. 242, pp. 1528-
1534 (1988); Proc. Natl. Aca
d. Sci. USA Vol. 87 pp. 2220-
2224 (1990); Progress in Gr
owth Factor Research, Vol.
1, pp. 267-280 (1989);
No. 00241, Tokiohei 3-503649, Tokiohei 3-
No. 505098, WO91 / 18098, WO92 / 0
5199, each publication of WO93 / 09229]. Also, the shape
Transformants are also used for production. [0003] The above-mentioned BMP is used to damage bone or cartilage.
How to treat wounds, defects or dysplasia
Various proposals have been made since the structure of BMP had not been elucidated.
Has become even more active with the production of recombinant human BMP.
I have. When using BMP, apply BMP alone locally
It's extremely difficult to induce bone formation by implanting
In general, BMP is supported locally on a carrier.
Implant. This is a small factor for local bone induction by BMP.
Days or weeks, and at least during that time BM
The main purpose is to keep P in the local area without diffusing
is there. Thus, the BMP carrier is used in vivo together with BMP.
Because it is implanted in, without losing BMP activity, low toxicity,
Required to have properties such as low carcinogenicity and low antigenicity
Be readily available and, in some cases, biodegradable.
Is also desired. Some technologies that have already been proposed include
BMP and collagen carrier on ceramic material support
(Japanese Unexamined Patent Publication No. 60-253455)
Report), rhBMP, porous biodegradable polymer and autologous
Composition comprising blood (US Pat. No. 5,171,57)
No. 9). However, these transplants
Safety, operability during surgery, and shaping.
Good was desired. [0004] On the other hand, inorganic burning to compensate for missing parts of teeth and bones
As a binder, biphasic calcium phosphate (Biphasi
c Calcium Phosphate (BCP)
It has been known to be used [Japanese Patent Laid-Open No. Hei 3-94761]
Report: Dental Journal, 36 (2): 167-177, 1
992]. BCP consists of hydroxyapatite (HA)
baking with β-tricalcium phosphate (β-TCP)
It is union. Its crystal structure is determined by X-ray analysis pattern
Hydroxyapatite (HA) phase and β-tricalcium
It may be a mixture with a phosphate (β-TCP) phase
It has been confirmed that hydroxyapatite and β-
By adjusting the mixing ratio with the calcium phosphate, various
BCP can be prepared. JP-A-3-94
No. 761 discloses hydroxyapatite (HA) and β-
Weight ratio with tricalcium phosphate (β-TCP)
Is 2: 8 to 8: 2, and the total of both is 90% by weight or more.
Granular sintered body / BCP has sufficient biocompatibility and bone
Has an active substitution action. I
However, the use of BCP-supplemented prosthesis results in the rise of bone formation
Is very slow, and in the early stages,
Conversely, less bone formation than control test without
(Dental Journal, supra). Therefore, sufficient bone formation
The disadvantage is that it takes a long time to obtain. What
The use of this BCP as a carrier for BMP has been
Not known at all. Rather, it is a component of BCP
Even if BMP is supported on certain hydroxyapatite,
It is reported that MP diffuses rapidly and osteoinduction does not occur
(Takaoka, et al, Clin. Or)
top. 234: 250-254, 1988). SUMMARY OF THE INVENTION The present inventor has proposed a
Having the above properties required as a carrier, and at the time of adaptation
Research on a carrier with excellent operability and shaping properties
In the past, it has never been used as a carrier for BMP
BCP is a very good carrier, and BCP
An osteogenic implant carrying MP can be rapidly transformed in vivo
It has been found that bone formation can be induced. This point
Is the combination of hydroxyapatite and BMP
Judging from the conventional knowledge that osteoinduction does not occur, it is surprising
That's what you need to do. Therefore, the purpose of the present invention is to
Induces bone formation quickly and gradually replaces new bone
And no or minimal graft retention
A transplant capable of forming favorable bone tissue, which has a problem in terms of antigenicity, etc.
Bone shape that is safe and has excellent operability and formability when adapting
An object of the present invention is to provide an implant for implantation. [0006] The above objects are achieved by the present invention.
(1) Recombination including a nucleotide sequence encoding human osteoinductive factor
Produced by a transformant containing DNA
Human osteoinductive factor (rhBMP), (2) hydroxyapatite and β-tricalcium phosphate
Fate and 90% by weight in total.
Weight ratio of patite to β-tricalcium phosphate
But 30:70 Biphasic calcium phosphate with a ratio of 10:90
(BCP) and contains substantially no collagen
Achieved by an osteogenic implant.
Can be. Hereinafter, the present invention will be described in detail. Of the present invention
Implants should primarily form bone (including cartilage) in vivo
Use by transplanting to the site. Transferring the implant of the present invention into a living body
When planted, BMP acts on the implanted local area to induce bone formation
Emit. BCP keeps this BMP local and desirable
Plays the role of a delivery system to form morphological bone
However, it also gradually absorbs itself in vivo,
Replaced by raw bone. BCP is a hydroxyapatite phase
Conductivity and β-Tricalcium Phosphate Derived from Bone
BMP has bone formation due to bioabsorbability derived from phase
Of osteoinductive ability, and gradually
Is replaced with new bone,
Living organisms that are less susceptible to infectious diseases caused by plant
Form good bone tissue equivalent to existing bone. Also, B
CP is a highly safe carrier that does not itself generate an immune response
At the same time, it is combined with collagen etc. as a carrier of BMP.
Bone formation can be induced without combining, and safety
Is advantageous on In addition, BCP has its porous nature
Thus, the BMP supportability is good and the BMP
This is advantageous in that it provides a microenvironment suitable for bone formation.
In addition, the implant of the present invention is easy to prepare during surgery, and
Excellent workability and formability. [0008] Osteoinductive factors that can be used in the present invention
(BMP) acts on undifferentiated mesenchymal cells,
Differentiation into chondrocytes and osteoblasts to form cartilage or bone
Protein that has R , Immunity etc clinical
Large quantities of materials with stable and stable quality can be obtained
Human BM produced by genetic recombination technology
P Is . That is, the base encoding human osteoinductive factor
A transformant (cell or cell) containing the recombinant DNA containing the sequence
Are microorganisms) and produced by these transformants.
Of isolated and purified recombinant human osteoinductive factor
It is a recombinant human osteoinductive factor (rhBMP). These chicks
Osteogenic factor (rhBMP) includes, for example, rhB
MP-2, rhBMP-3, rhBMP-4 (rhBM
P-2B), rhBMP-5, rhBMP-
6, rhBMP-7, rhBMP-8, rhBMP
List telodimers or their variants or partially deficient forms
be able to. These proteins may be used alone or in combination of two or more.
It can be used as a mixture above. [0009] These rhBMPs are used in mammalian cells (eg,
For example, CHO cells), microorganisms (eg, E. coli) or yeast
It can be expressed in a mother cell or the like. Already large
The rhBMP for which the production method and purification method have been established is r
There is hBMP-2, but other rhBMPs are produced in the same way.
Manufactured, purified and used [Progress
in Growth Factor Research
h, Vol. 1, pp. 267-280 (198
9)]. The already known purified rhBMP-2 is N-terminal.
Mature peptide consisting of multiple monomers with different terminal amino acid sequences
A dimeric protein having a molecular weight of about 30,000
Quality. Each monomer is Asn ⁵⁶ High on residue
It has a mannose-type sugar chain [Abstract
Sixth Interaction Sympos
ium of the ProteinSociety
y, San Diego, CA (1992)]. [0010] Biphasic phosphorus which can be used in the present invention
Calcium acid (BCP) Is , Hydroxyapatite and β
90% by weight or more in total with tricalcium phosphate
BCP including above And Good biocompatibility To . Hydro
Xiapatite has inherently good osteoconductivity.
However, it is hardly absorbed in vivo. On the other hand, β-trical
Sium phosphate has low osteoconductivity but is absorbed in vivo
Is done. Therefore, hydroxyapatite and β-trical
By changing the composition ratio with calcium phosphate
As mentioned above, the osteoconductivity and bioabsorbability of BCP
Can be adjusted appropriately. The BCP used in the implant of the present invention is
BMP while maintaining osteoconductivity of xiapatite
To the extent that it replaces the new bone induced by urea well
It is preferable to have the property. These favorable properties
In a BCP having a hydroxyapatite / β-tri
The calcium phosphate ratio (weight) 30/70 Absent
Within the range of 10/90 . Hi Droxyapatite /
β-tricalcium phosphate weight ratio of about 30/70
Most of the transplanted BCP is absorbed in vivo when:
And Further Above about 20/80, it is completely absorbed in vivo
Is particularly preferred. The weight ratio exceeds 50/50
Increases the amount of hydroxyapatite remaining inside the new bone
In addition, it may cause bone resorption and infections due to remodeling, etc.
On the other hand, if it is less than 10/90,
This is not preferable because the bone conduction ability of the patient becomes insufficient. BCP can be prepared by a known method.
Kiru (Japanese Patent Publication No. 60-25383, Japanese Patent Publication No. 60-507)
No. 44, JP-A-3-94761, JP-A-3-1370
No. 79, JP-A-4-2355, JP-A-5-11705
No. 6 or JP-A-5-161707. For example,
Hydroxyapatite and β-tricalcium phosphate
And at the firing stage of about 1100-1200 ° C
Prepare. By the method described above, BCP is usually porous.
It is prepared as porous granules. This porous granular BCP
It can be used as it is as a carrier of the implant of the present invention.
You. The size of the granular carrier is not particularly limited.
From the viewpoint of operability and adaptability when preparing and transplanting
Or about 5 mm or less, more preferably 100 to 1000
μm, particularly preferably 400 to 600 μm. Ma
In addition, the specific surface area of the porous granular carrier is not particularly limited.
However, in terms of providing BMP loading efficiency and a place for bone formation,
Preferably about 0.3 m ^Two / G or more, more preferably 0.
5-1.0m ^Two / G, particularly preferably 0.7 to 0.8 m
^Two / G. [0014] BCP is a porous blower having a predetermined shape.
This porous block can be obtained as
Can be used as a carrier of the implant of the present invention.
Wear. The porous block-shaped molded article is obtained by a known method.
Of hydroxyapatite and β-tricalcium phosphate
Directly by baking from a sheet or granulated BC
It can be prepared by recalcining P. This porous blow
The shape of the molded product not only adjusts the shape during preparation, but also
Easily change to the desired shape even after molding (especially during transplantation)
be able to. Size and shape of the porous block-shaped compact
May be appropriately adjusted according to the transplantation site and the purpose of transplantation. Ma
The specific surface area is not particularly limited, either,
For the same reasons as the body, preferably in the same range as above
No. BMP is supported on the BCP carrier,
The method for preparing the implant of the present invention is particularly limited.
But not for example a BMP solution (or suspension) in a suitable liquid
Liquid) in BCP carrier, impregnated, sprayed, coated or dropped etc.
Followed by drying (preferably under reduced pressure or
Freeze-dried) to easily obtain the desired transplant.
You. It is preferably freeze-dried after impregnation under reduced pressure. I
In the case of misalignment, BC activity is maintained without losing BMP activity.
Disperse BMP almost uniformly throughout the porous part of P
Are preferred. Thus, porous granular
A porous granular implant can be obtained from the carrier,
Of porous block-shaped implant from porous block-shaped carrier
be able to. Further, a group of the porous granular implants described above.
Rapidly degrades in vivo within hours or days
Suitable biocompatible containers, such as capsules (eg,
Gelatin capsule, soft capsule, etc.), bag-shaped sheet
(For example, a gelatin film)
Wrap it in a degradable sheet, etc.
It can also be a cage implant. Further, the implant of the present invention is characterized in that the porous condyle described above is used.
Thickener before, after or simultaneously applying BMP to granular BCP
Solid, semi-solid, clay-like, shaped into the desired shape,
It may be a paste or an aggregate of a highly viscous fluid.
Wear. Thickeners include biocompatibility, safety and
Or biodegradable, and together with granular BCP,
There is no particular limitation as long as the aggregate can be formed.
However, for example, cellulosic polymer compounds such as
Droxypropyl methylcellulose, hydroxypropyl
Cellulose or carboxymethylcellulose; polymilk
Acid (PLA), polyglycolic acid (PLG) or this
Copolymer (PLGA); polylactic acid (PLA),
Liglycolic acid (PLG) or their copolymers (P
LGA) and polyethylene glycol (PEG)
Limmer; hyaluronic acid; alginic acid; gelatin; Or H
Evelyn Glue, etc. Can be mentioned. A thickener is added to the porous granular carrier.
The method is not particularly limited, either.
Thickener solution in a suitable liquid, similar to the MP loading method
(Or suspension) immersed in, impregnated with, sprayed on, sprayed on, coated with, or applied to a carrier
Add by the following method and then dry (preferably reduced)
Pressure or freeze-drying). Preferably impregnated under reduced pressure
After freeze drying. In each case, the activity of BMP
Thickens the entire porous portion of BCP without losing
A method that can disperse the agent almost uniformly is preferred
No. Thus, obtaining an aggregate-like implant according to the present invention
Can be. [0018] The amount of BMP carried by the implant can reduce bone formation.
The minimum BMP concentration needed to wake up
Degree) should be more. With the increase of BMP concentration
Bone formation increases, but above a certain value, bone formation is almost
It will be constant. Generally, this amount of bone formation depends on the size of the implant.
(Or the volume occupied by the group of granular implants).
That is, even if the concentration is excessively increased,
Bones are not formed. Implanting a transplant containing an appropriate concentration of BMP
The size and shape of the bone formed during
And shape in principle. Therefore, the specific mixing ratio
And BMP concentration, BCP type, shape, degree of porosity,
Appropriate depending on the application site of the implant, preferred bone formation rate etc.
Can be determined. For example, a granular BCP carrier and r
When preparing the implant of the present invention using hBMP-2
Is 1 μg of rhBMP-2 per bone or cartilage to be formed.
Capacity 1 ml or more, preferably 5 to 1,000 μg / same 1
ml, more preferably an amount of 10 to 300 μg / 1 ml.
It is preferred to carry it. The implant of the present invention contains components other than those described above.
can do. As those desired components, specifically
Is a stabilizer, preservative, solubilizer, pH adjuster or thickener
Agents and the like. It is also beneficial for bone or cartilage formation.
Additional components such as calcium phosphate, hydroxy
Mineral components such as apatite, bone or cartilage formation assistance
Action promoting components such as factors, fibronectin, osteone
Kuching or non-antigenic IBM (insoluble bone matrix
And the like. These desired components are
At a suitable stage to produce a clear implant, a suitable method
More can be added. The implant of the present invention can be prepared at the time of use.
Store well or under appropriate conditions until ready for use after preparation.
It may be. The implant of the present invention can be used for various bone or cartilage defects.
To repair the loss, use any known method in the art
Can be transplanted to That is, conventionally known
Like implants, it can be applied to living organisms,
According to the target, use, indication site, patient condition, etc.
It can be applied appropriately according to a conventional method. The implant of the present invention is formed as described above.
Substantially define the shape of the new bone. That is, the transfer
Bone formation occurs corresponding to the shape of the implant. Specifically, the book
At the site where the invention implant was implanted, it was collected around the implant.
BCP is gradually phagocytosed and absorbed by dead macrophages
And is replaced by new bone induced by BMP. Follow
Therefore, the implant of the present invention should be placed along the shape expected for bone formation.
It is desirable to mold. In addition, the transplant of the present invention
There is no need for removal surgery after transplantation. The various implants according to the present invention are
Not only used alone, but also arbitrarily combined
May be used. In addition, another known implant different from the implant of the present invention
May be used in combination. For example, artificial implant
Around the implant material, the granular implant according to the invention and / or
Can be implanted by attaching a block-shaped implant
You. Especially in dental applications, the granules according to the invention
It is effective to use the GTR method in combination with a dendritic implant. Furthermore, artificial
When implanting a tooth root, the present invention is implanted in a contact portion with a bone perforated portion.
It is also effective to attach the body. Localization of the implant of the present invention
To fix, maintain shape or when strength is not enough
Can be used in combination with other known reinforcing materials. Reinforcement
Is, for example, a biocompatible membrane for fixing the implant,
For example, collagen membrane or Gore-Tex membrane used for GTR method
Or polylactic acid membrane, or the implant of the present invention and tissue in vivo
Fixtures (especially bones), eg metal plates, for osteosynthesis
Pins or fixed nails, etc.
Then, after bone formation, it can be surgically removed. Ma
Further, it may be used in combination with another known transplant. The present invention will be described in more detail with reference to the following examples.
Although described, these are not intended to limit the scope of the present invention.
Absent. Example 1 (1) Preparation of Transplant The BCP carrier is β-tricalcium phosphate
80% and 20% of hydroxyapatite are baked (baked)
Granulated BCP produced by mixing at 1150 ° C)
(Particle size: 420-590 μm; specific gravity: 3.1; specific surface
Product: 0.076m ^Two / G; made by Japan Special Ceramics KK)
For BMP, rhB provided by Yamanouchi Pharmaceutical
Arginine of MP-2 (0.5M) / L-histidine
(10 mM) aqueous solution (pH 6.5) was used. BCP condyle
Approximately 700 μl of the granules are added to an rhBMP-2 aqueous solution (rhBMP-2
-2: 50 μg and 10 μg) under reduced pressure for about 1 hour.
After immersion for hours, freeze-dry to obtain a granular implant
Was. Put these two types of transplants in a gelatin capsule,
It was stored at -20 ° C until the time of the transplantation test. (2) Osteogenesis test Wistar male rats (7 weeks old) (five rats in each group)
Make a skin incision in the area and place it in the subcutaneous loose connective tissue
Implant the capsule containing the transplant prepared in (1)
Was. As a control, rhBMP-2 was loaded.
Capsule containing only BCP granules without
Transplanted. After 3 weeks from transplantation, carefully peel back skin
Release and remove the implant as a lump and immediately formalin
Fixation was performed, followed by radiography. According to customary law
Decalcified paraffin sections were prepared and hematoxylin and
After staining, the cells were observed with an optical microscope. (3) Results A group implanted with a transplant containing 50 μg of rhBMP-2
In all five cases, formation of bone-like tissue was observed.
Most of the bone-like tissues are spherically formed around cells
Population of small bone-like tissue that has been
It was observed as new bone tissue having a plate-like structure. This one
A micrograph of the example is shown in FIG. 10 μm rhBMP-2
1 group out of 5 cases in the group implanted with the implant containing g
In the center of some BCP granules, the same bone-like tissue
Formation was seen, but in the other four cases a clear skeletal structure
No weave formation was observed. In the control group
Shows no apparent formation of bone-like tissue, and BCP granules
Many cells are observed in the inside, and multinucleated giant cells are observed around the BCP granules.
I was guessed. In the above test, small bone-like
A population of tissues was observed and continued in some of that population
A relatively differentiated new bone tissue was observed in the intergranular area
Therefore, when the porous implant of the present invention is implanted,
Small spherical bone-like tissue is formed inside the implant,
Later, it was thought that more differentiated bone tissue had formed around it.
It is. In the ectopic osteoinduction model described above,
In just three weeks, the above-mentioned bone formation was observed.
Low inflammation was confirmed in the body. Therefore, the present invention
Implants can rapidly induce bone formation in vivo and
Gradually replace with raw bone to completely eliminate residual graft
Or minimized, forming good bone tissue
And it is safe in terms of antigenicity
It has been shown. The granular transfer prepared in Example 1 (1)
The implant was filled into the alveolar bone defect caused by periodontal disease
Can also be applied. In addition, before using the GTR method
The granular implant described above may be fixed. [0027] Example 2 (1) Cylinder shaped according to the shape of the bone defect to be transplanted
RhBMP-2 Argi on a porous BCP block
Nin (0.5 M) -L-histidine (10 mM) aqueous solution
(PH 6.5) was added to 100 μg / BC of rhBMP-2.
Immerse the P block in a volume of 1 ml under reduced pressure, then freeze
Drying is performed to prepare a block-shaped implant. Thus obtained
The block-shaped graft is applied to the bone defect
In addition, the block-shaped implant and the remaining bone can be combined with each other.
You may fix with a metal plate. (2 ) RhBM was added to the same BCP granules as in Example 1 (1).
After immersing and drying the aqueous solution containing P-2,
Polylactic Acid (Molecular Weight 650)-Polyethylene Glyco
(Molecular weight 200) block copolymer (PLA-PE)
G) is added to prepare a highly viscous gel-like implant. ( 3 ) Carboxymethylcellulo instead of PLA-PEG
Example 2 (except that 2 Operation similar to)
A crop-like implant is prepared by cropping. As described above, the implant of the present invention can rapidly form a bone in vivo.
Induces growth and gradually replaces new bone, leaving the remaining
Complete or minimal presence and good bone
Can form tissue, is safe in terms of antigenicity, etc.
It is also excellent in operability and shaping during adaptation. Follow
Caused by trauma, disease or congenital defect
To repair various bone or cartilage defects
It can be applied to the affected area in a manner known in the field. Departure
When transplanted into a living body, a bright transplant has low
Excellent compatibility. In addition, new bone and living body
The continuity with existing bones is also good,
Can repair cartilage. The implant of the present invention can be used for various components.
Can be applied to the field, for example, trauma such as a fracture, tumor
Or diseases such as inflammatory, degenerative or necrotic bone diseases, brain
By bone extraction accompanying surgery such as surgery or orthopedic surgery
Repair of bone or cartilage defect, promotion of healing of various fractures, human
Artificial implants such as artificial joints, artificial bones or artificial roots
Bone formation around the body, promotes fixation when using artificial implants
Bone in orthopedic fields such as advancement, spinal fixation promotion and leg extension
Bone repair, cartilage regeneration, joint reconstruction, plastic surgery
Or cartilage replacement, or bone, cartilage or
Restoration of bone quality, bone growth for implant use, etc.
It is suitable for. Among the implants of the present invention, granular implants and coagulated
Collective transplants are particularly useful for repairing small bone or cartilage defects,
Promotes healing of various fractures, or bone and soft
Bone or bone for cementitious repair or implant use
For bone (cartilage) deficiency, which makes it easy to fix grafts,
High usefulness, but also large bone loss, constant strength
Necessary parts or maintenance of specific shape
For bone defects at the site where
It is advantageous to use a denture implant.

【図面の簡単な説明】 【図１】実施例１で実施した、ｒｈＢＭＰ−２（５０μ
ｇ）配合移植体を埋植したラットにおける骨形成組織像
を示す図面に代わる写真である。BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 shows the results of rhBMP-2 (50 μ
g) A photograph instead of a drawing showing an osteogenic tissue image of a rat implanted with a compound implant.

フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭61−259675（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−94761（ＪＰ，Ａ) 特開 平６−7385（ＪＰ，Ａ) 特開 平１−158964（ＪＰ，Ａ) 特表 平２−500241（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61L 27/00 Continuation of the front page (56) References JP-A-61-259675 (JP, A) JP-A-3-94761 (JP, A) JP-A-6-7385 (JP, A) JP-A-1-158964 (JP) , A) Special table Hei 2-500241 (JP, A) (58) Fields investigated (Int. Cl. ⁷ , DB name) A61L 27/00