NO176096B - Process for preparing a pyrrole-heptanoic acid derivative - Google Patents

Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en fremgangsmåte for fremstilling av [R-(R<*>,R*)]-2-(4-f luorof enyl) -jS , <5-dihydroksy-5- (1-metyletyl) -3-fenyl-4- [ (fenyl-amino)-karbonyl]-lH-pyrrol-l-heptansyre eller (2R-trans)-5-(4-fluorofenyl)-2-(1-metyletyl)-N,4-difeny1-1-[2-(tetrahydro-4-hydroksy-6-okso-2H-pyran-2-yl)etyl]-lH-pyrrol-3-karboksamid. The present invention provides a process for the preparation of [R-(R<*>,R*)]-2-(4-fluorophenyl)-jS , <5-dihydroxy-5-(1-methylethyl)-3- phenyl-4-[ (phenyl-amino)-carbonyl]-1H-pyrrole-1-heptanoic acid or (2R-trans)-5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N,4-diphenyl-1- 1-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-1H-pyrrole-3-carboxamide.

Trans-(±)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-metyletyl)-N,4-difenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroksy-6-okso-2H-pyran-2-yl)etyl]-1H-pyrrol-3-karboksamider er blant de forbindelser som beskrives i US patentskrift nr. 4.681.893, hvilke er nyttige som inhibitorer av cholesterolbiosynteser. Forbindelsene der omfatter i store trekk 4-hydroksypyran-2-oner og de tilsvarende ringåpnede syrer avledet derav. Trans-(±)-5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N,4-diphenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2- yl)ethyl]-1H-pyrrole-3-carboxamides are among the compounds described in US Patent No. 4,681,893 which are useful as inhibitors of cholesterol biosynthesis. The compounds there broadly comprise 4-hydroxypyran-2-ones and the corresponding ring-opened acids derived from them.

Det har nu uventet vist seg at enantiomeren med R-konfigurasjon av den ringåpnede syre av trans-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-metyletyl)-N,4-difenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroksy-6-okso-2H-pyran-2-yl)etyl]-lH-pyrrol-3-karboksamid, dvs. [R- (R*, R*) ] -2- (4-f luorf enyl) -/?, <S-dihydroksy-5- (1-metyletyl)-3-feny1-4-[(fenylamino)-karbonyl]-lH-pyrrol-1-heptansyre, tilveiebringer overraskende inhibering av biosyntesen av cholesterol. It has now unexpectedly been shown that the R-configuration enantiomer of the ring-opened acid of trans-5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N,4-diphenyl-1-[2-(tetrahydro-4 -hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-1H-pyrrole-3-carboxamide, i.e. [R-(R*, R*)] -2-(4-fluorophenyl)- /?, <S-dihydroxy-5-(1-methylethyl)-3-phenyl-4-[(phenylamino)-carbonyl]-1H-pyrrole-1-heptanoic acid surprisingly provides inhibition of cholesterol biosynthesis.

Det er kjent at 3-hydroksy-3-metylglutaryl-coenzym A (HMG-CoA) eksisterer som 3R-stereoisomeren. Videre ligger, som vist ved studiet av en rekke 5-substituerte 3,5-dihydroksypentansyrer av Stokker et al., i "3-Hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A Reductase Inhibitors. 1. Structural Modification of 5-Substituted 3,5-Dihydroxypentanoic acids and Their Lactone Derivatives", J. Med. Chem. 1985, 28, 347-358, all den biologiske aktivitet i det vesentlige hos trans-diastereomeren av (E)-6-[2-(2,4-diklorfenyl)etenyl]-3,4,5,6-tetrahydro-4-hydroksy-2H-pyranon med positiv rotasjon. Videre kreves tilsynelatende absolutt konfigurasjon av /3-hydroksy-<5-lakton-delen felles med mevinolin med formelen (la) og compactin med formelen (lb) 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A (HMG-CoA) is known to exist as the 3R stereoisomer. Furthermore, as shown by the study of a number of 5-substituted 3,5-dihydroxypentanoic acids by Stokker et al., in "3-Hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A Reductase Inhibitors. 1. Structural Modification of 5-Substituted 3,5 -Dihydroxypentanoic acids and Their Lactone Derivatives", J. Med. Chem. 1985, 28, 347-358, substantially all of the biological activity of the trans diastereomer of (E)-6-[2-(2,4-dichlorophenyl)ethenyl]-3,4,5,6-tetrahydro-4 -hydroxy-2H-pyranone with positive rotation. Furthermore, apparently absolute configuration of the /3-hydroxy-<5-lactone moiety is required in common with mevinolin of formula (Ia) and compactin of formula (Ib)

til inhibering av HMG-CoA reduktase. Dette er beskrevet av Lynch et al. i "Synthesis of an HMG-CoA Reductase Inhibitor; A Diastereoselective Aldol Approach" i Tetrahedron Letters, Vol. 28, nr. 13, s. 1385-1388 (1987) som 4R,6R-konfigurasjonen. for inhibition of HMG-CoA reductase. This is described by Lynch et al. in "Synthesis of an HMG-CoA Reductase Inhibitor; A Diastereoselective Aldol Approach" in Tetrahedron Letters, Vol. 28, No. 13, pp. 1385-1388 (1987) as the 4R,6R configuration.

Imidlertid kunne fagmannen ikke på bakgrunn av ovennevnte beskrivelser forutse den uventede og overraskende inhibering av cholesterolbiosyntesen som oppnås ved hjelp av den foreliggende oppfinnelse. However, the person skilled in the art could not, on the basis of the above-mentioned descriptions, foresee the unexpected and surprising inhibition of cholesterol biosynthesis which is achieved by means of the present invention.

I overensstemmelse hermed tilveiebringer den foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for fremstilling av [R- (R*, R*) ] -2-(4-fluorfenyl)<5-dihydroksy-5-(1-metyletyl) -3-fenyl-4-[(fenylamino)-karbonyl]-lH-pyrrol-l-heptansyre (forbindelse med formel I)/ farmasøytisk akseptable salter derav og (2R-trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-metyletyl)-N,4-difenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroksy-6-okso-2H-pyran-2-yl)-etyl]-lH-pyrrol-3-karboksamid (laktonformen av heptansyren Accordingly, the present invention provides a process for the preparation of [R-(R*, R*)]-2-(4-fluorophenyl)<5-dihydroxy-5-(1-methylethyl)-3-phenyl-4- [(phenylamino)-carbonyl]-1H-pyrrole-1-heptanoic acid (compound of formula I)/ pharmaceutically acceptable salts thereof and (2R-trans)-5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N ,4-diphenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)-ethyl]-1H-pyrrole-3-carboxamide (the lactone form of heptanoic acid

eller forbindelsen med formel II). or the compound of formula II).

De farmasøytisk akseptable salter som kan fremstilles ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er slike som vanligvis avledes ved oppløsning av den frie syre eller laktonet, fortrinnsvis laktonet i vann eller vandig alkoholoppløsnings-middel eller andre egnede oppløsningsmidler med en passende base og isolering av saltet, ved inndampning av oppløsningen eller ved omsetning av den frie syre eller laktonet, fortrinnsvis laktonet og base i et organisk oppløsningsmiddel, hvor saltet utskilles direkte eller kan oppnås ved konsentrering av oppløsningen. The pharmaceutically acceptable salts which can be prepared by the process according to the invention are those which are usually derived by dissolving the free acid or the lactone, preferably the lactone in water or aqueous alcohol solvent or other suitable solvents with a suitable base and isolation of the salt, by evaporation of the solution or by reaction of the free acid or the lactone, preferably the lactone and base in an organic solvent, where the salt is separated directly or can be obtained by concentrating the solution.

I praksis er anvendelse av saltformen det samme som anvendelse av syre- eller laktonformen. Passende farmasøytisk akseptable salter innenfor oppfinnelsens rammer er slike avledet fra baser så som natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd, litiumhydroksyd, kalsiumhydroksyd, l-deoksy-2-(metylamino)-D-glucitol, magnesiumhydroksyd, sinkhydroksyd, aluminiumhydroksyd, jern(II)-eller jern(III)hydroksyd, ammoniumhydroksyd eller organiske aminer så som N-metylglucamin, cholin, arginin eller lignende. Fortrinnsvis fremstilles litium-, kalsium-, magnesium-, aluminium- og jern(II)- eller jern(III)saltene fra natrium- eller kaliumsaltet ved tilsetning av det passende reagens til en < oppløsning av natrium- eller kaliumsaltet, dvs. tilsetning av kalsiumklorid til en oppløsning av natrium- eller kaliumsaltet av forbindelsen med formel I, gir kalsiumsaltet derav. In practice, use of the salt form is the same as use of the acid or lactone form. Suitable pharmaceutically acceptable salts within the scope of the invention are those derived from bases such as sodium hydroxide, potassium hydroxide, lithium hydroxide, calcium hydroxide, l-deoxy-2-(methylamino)-D-glucitol, magnesium hydroxide, zinc hydroxide, aluminum hydroxide, iron (II) or iron ( III) hydroxide, ammonium hydroxide or organic amines such as N-methylglucamine, choline, arginine or the like. Preferably, the lithium, calcium, magnesium, aluminum and iron (II) or iron (III) salts are prepared from the sodium or potassium salt by adding the appropriate reagent to a < solution of the sodium or potassium salt, i.e. adding calcium chloride to a solution of the sodium or potassium salt of the compound of formula I, gives the calcium salt thereof.

Den frie syre kan fremstilles ved hydrolyse av laktonformen med formel II eller ved å lede saltet gjennom en kationbytterharpiks (H+<-> harpiks) og avdampning av vannet. The free acid can be produced by hydrolysis of the lactone form with formula II or by passing the salt through a cation exchange resin (H+<-> resin) and evaporating the water.

Den mest foretrukne utførelsesform av den foreliggende oppfinnelse er fremstilling av [R-(R<*>,R<*>)]-2-(4-fluorfenyl)-/3, 5-dihydroksy-5-(1-metyletyl) -3-f enyl-4- [ (f enylamino) - karbonyl]-lH-pyrrol-l-heptansyre,hemikalsiumsaltet. The most preferred embodiment of the present invention is the preparation of [R-(R<*>,R<*>)]-2-(4-fluorophenyl)-/3,5-dihydroxy-5-(1-methylethyl)- 3-phenyl-4-[(phenylamino)-carbonyl]-1H-pyrrole-1-heptanoic acid, the hemicalcium salt.

Forbindelsene I eller II kan generelt fremstilles ved en fremgangsmåte som karakteriseres ved at man The compounds I or II can generally be prepared by a method which is characterized by the fact that

1) behandler en forbindelse med formel (1) 1) treats a compound of formula (1)

med en forbindelse med formel (2) i tetrahydrofuran i ca. en time ved fra -80 til -9 0°C og derefter behandler med eddiksyre for å oppnå forbindelse (3) 2) behandler forbindelsen (3) fra trinn 1 med et lite overskudd av natriummetoksyd i metanol ved ca. -10°C i inntil 16 timer for å oppnå forbindelsen med formel (4) 3) behandler forbindelsen (4) fra trinn 2 med et stort overskudd av ved fra -30 til 40°C i inntil 5 timer for å oppnå forbindelsen med formel (5) with a compound of formula (2) in tetrahydrofuran for approx. one hour at from -80 to -90°C and then treat with acetic acid to obtain compound (3) 2) treat the compound (3) from step 1 with a small excess of sodium methoxide in methanol at approx. -10°C for up to 16 hours to obtain the compound of formula (4) 3) treat the compound (4) from step 2 with a large excess of wood from -30 to 40°C for up to 5 hours to obtain the compound of formula (5)

og and

4) behandler forbindelsen (5) fra trinn 3 med trietylboran efterfulgt av natriumborhydrid i metanol efterfulgt.av tilsetning av hydrogenperoksyd for å oppnå [R-(R*,R*)]-2-(4-f luorofenyl) -j8 , c5-dihydroksy-5-(1-metyletyl) -3-fenyl-4-[(fenylamino)-karbonyl]-1H- pyrrol-l-heptansyre og farmasøytisk akseptable salter derav, eller om ønsket 5) ringslutter forbindelsen fra trinn 4 for å oppnå (2R-trans)-5- (4-fluorofenyl)-2-(1-metyletyl)-N,4-difenyl-1-[2-(tetrahydro-4- hydroksy-6-okso-2H-pyran-2-yl)etyl]-1H-pyrrol-3-karboksamid. 4) treating the compound (5) from step 3 with triethylborane followed by sodium borohydride in methanol followed by the addition of hydrogen peroxide to obtain [R-(R*,R*)]-2-(4-fluorophenyl)-j8 , c5 -dihydroxy-5-(1-methylethyl)-3-phenyl-4-[(phenylamino)-carbonyl]-1H-pyrrole-1-heptanoic acid and pharmaceutically acceptable salts thereof, or if desired 5) ring-closes the compound from step 4 to obtain (2R-trans)-5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N,4-diphenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2 -yl)ethyl]-1H-pyrrole-3-carboxamide.

Racematet fremstilles ved fremgangsmåten beskrevet i US patentskrift nr. 4.681.89 3 som herved inkorporeres som referanse. The racemate is prepared by the method described in US Patent No. 4,681,893, which is hereby incorporated by reference.

Chiralsyntesen er vist i skjema 1 (hvor Ph er fenyl) nedenfor: The chiral synthesis is shown in Scheme 1 (where Ph is phenyl) below:

Skjema 1 Form 1

Betingelsene i skjema 1 er generelt som angitt i eksempel 1-5 i det følgende. The conditions in form 1 are generally as stated in examples 1-5 below.

En fagmann kan erkjenne variasjoner i skjema 1, som er hensiktsmessig for fremstillingen av forbindelsene. A person skilled in the art can recognize variations in Scheme 1 which are appropriate for the preparation of the compounds.

Forbindelsene fremstilt ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen og særlig forbindelsene med formel I inhiberer The compounds produced by the method according to the invention and in particular the compounds of formula I inhibit

biosyntesen av cholesterol som vist ved CSI-screening, hvilken er beskrevet i US patentskrift nr. 4.681.893 som herefter også er inkorporert som referanse. CSI-data for forbindelse I, dens enantiomer forbindelse II og racematet av disse to the biosynthesis of cholesterol as shown by CSI screening, which is described in US Patent No. 4,681,893, which is also incorporated herein by reference. CSI data for compound I, its enantiomeric compound II and the racemate of these two

forbindelser er som følger: connections are as follows:

Forbindelsene fremstilt ifølge oppfinnelsen kan anvendes i farmasøytiske preparater og administreres til pasienten i dosenivåer fra 10 til 500 mg pr. dag, hvilket for et normalt voksent menneske på ca. 70 kg vil bety en dose på 0,14 til 7,1 mg/kg legemsvekt per dag. Dosen er fortrinnsvis fra 0,5 til 1,0 mg/kg pr. dag. The compounds produced according to the invention can be used in pharmaceutical preparations and administered to the patient in dose levels from 10 to 500 mg per day, which for a normal adult person of approx. 70 kg would mean a dose of 0.14 to 7.1 mg/kg body weight per day. The dose is preferably from 0.5 to 1.0 mg/kg per day.

Dosen administreres fortrinnsvis som enhetsdoseform. Enhetsdoseformen for oral eller parenteral anvendelse kan varieres eller justeres fra 10 til 500 mg, fortrinnsvis fra 20 til 100 mg i overensstemmelse med den særlige applikasjon og styrken av den aktive ingrediens. Preparatene kan om ønsket også inneholde andre aktive terapeutiske midler. Bestemmelse av optimal dose i en særlig situasjon ligger innenfor fag-mannens kompetanse. The dose is preferably administered as a unit dosage form. The unit dosage form for oral or parenteral use may be varied or adjusted from 10 to 500 mg, preferably from 20 to 100 mg in accordance with the particular application and the strength of the active ingredient. If desired, the preparations can also contain other active therapeutic agents. Determining the optimal dose in a particular situation is within the competence of the expert.

Forbindelsene med formel I og II og deres farmasøytisk akseptable salter er generelt ekvivalente mht. aktivitet ved anvendelse som beskrevet her. The compounds of formulas I and II and their pharmaceutically acceptable salts are generally equivalent with respect to activity when used as described here.

De etterfølgende eksempler illustrerer bestemte fremgangsmåter ifølge oppfinnelsen for fremstilling av forbindelser. Disse eksempler er således ikke begrensende for The following examples illustrate specific methods according to the invention for the preparation of compounds. These examples are thus not limiting

omfanget av oppfinnelsen. the scope of the invention.

Eksempel 1 Example 1

285 ml 2,2 M n-butyllitium (i heksan) settes dråpevis til 92 ml diisopropylamin i 300 ml THF ved 50-60°C i en 1000 ml énhalset kolbe via skilletrakt og under nitrogen. Den godt omrørte gule oppløsning får oppvarmes til -2 0°C. Derefter føres den via rør til en suspensjon av 99 g S-(+)-2-acetoksy-1,1,2-trifenyletanol i 500 ml absolutt THF, oppbevart i en 2L-3-halset kolbe ved -70°C. Når tilsetningen er fullført får reaksjonsblandingen oppvarmes til -10°C i løpet av to timer. I mellomtiden fremstilles en suspensjon av 0,63 mol MgBr^ ved å dryppe 564 ml (0,63 mol) brom i en suspensjon av 15,3 g magnesium (0,63 mol) i 500 ml THF i en 3L kolbe utstyret med tilbakeløpskjøler og rører som er fastgjort over kolben. Når dette er avsluttet, avkjøles MgBr2 suspensjonen til -78°C og enolatoppløsningen (mørkebrun) overføres via rør til suspensjonen i løpet av 3 0 minutter. Omrøring fortsettes i 60 minutter ved -78°C. 150 g 5-(4-fluorfenyl)-2-(1-metyletyl)-l-(3-oksopro-pyl)-N,4-difenyl-lH-pyrrol-3-karboksamid i 800 ml absolutt THF tilsettes dråpevis i løpet av 3 0 minutter, hvorefter det omrøres i 90 minutter ved -78°C, hvorefter reaksjonen stanses med 2 00 ml AcOH ved -7 8°C. Reaksjonsblandingen overføres til et kaldt bad, 500 ml E^ O tilsettes og blandingen konsentreres i vakuum ved 40-50°C. 500 ml 1:1 EtOAc/heptan settes til den gule oppslemning og filtreres. Filtratet vaskes grundig med 0,5 N HC1, derefter flere ganger med H20 og endelig med EtOAc/heptan (3:1) som er avkjølt med tørris til -20°C. Det lysebrune krystallinske produkt (eksempel IA) tørres i vakuumovn ved 4 0°C. Utbyttet er 194 g. 285 ml of 2.2 M n-butyllithium (in hexane) is added dropwise to 92 ml of diisopropylamine in 300 ml of THF at 50-60°C in a 1000 ml one-necked flask via a separatory funnel and under nitrogen. The well-stirred yellow solution is allowed to warm to -2 0°C. It is then piped to a suspension of 99 g of S-(+)-2-acetoxy-1,1,2-triphenylethanol in 500 ml of absolute THF, stored in a 2L-3-necked flask at -70°C. When the addition is complete, the reaction mixture is allowed to warm to -10°C within two hours. Meanwhile, a suspension of 0.63 mol of MgBr^ is prepared by dropping 564 mL (0.63 mol) of bromine into a suspension of 15.3 g of magnesium (0.63 mol) in 500 mL of THF in a 3 L flask equipped with a reflux condenser and pipes which are attached above the flask. When this is finished, the MgBr2 suspension is cooled to -78°C and the enolate solution (dark brown) is transferred via tube to the suspension within 30 minutes. Stirring is continued for 60 minutes at -78°C. 150 g of 5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-1-(3-oxopropyl)-N,4-diphenyl-1H-pyrrole-3-carboxamide in 800 ml of absolute THF are added dropwise during of 30 minutes, after which it is stirred for 90 minutes at -78°C, after which the reaction is stopped with 200 ml of AcOH at -78°C. The reaction mixture is transferred to a cold bath, 500 ml E2 O is added and the mixture is concentrated in vacuo at 40-50°C. 500 ml of 1:1 EtOAc/heptane is added to the yellow slurry and filtered. The filtrate is washed thoroughly with 0.5 N HCl, then several times with H 2 O and finally with EtOAc/heptane (3:1) which is cooled with dry ice to -20°C. The light brown crystalline product (Example IA) is dried in a vacuum oven at 40°C. The yield is 194 g.

Produkt IA omkrystalliseres fra EtOAc ved -10°C for å oppnå 100 g produkt IB og omkrystalliseres derefter fra aceton/pentan for å oppnå 90 g produkt 1C. Moderluten fra vask av det rå materiale kombineres og omkrystalliseres fra EtOAc/- heksan. 33 g IB viser følgende HPLC: 97,4:2,17 av R,S- til S,S-isomeren. 28,5 g 1C viser følgende HPLC: 95,7:3,7. IB og 1C kombinert omkrystalliseres fra CHCl^rMeOH 10:1, hvilket gir et produkt 1F som hvite krystaller i et utbytte på 48,7 g. Product IA is recrystallized from EtOAc at -10°C to obtain 100 g of product IB and then recrystallized from acetone/pentane to obtain 90 g of product 1C. The mother liquor from washing the crude material is combined and recrystallized from EtOAc/hexane. 33 g of IB shows the following HPLC: 97.4:2.17 of the R,S to S,S isomer. 28.5 g of 1C shows the following HPLC: 95.7:3.7. IB and 1C combined are recrystallized from CHCl^rMeOH 10:1 to give a product 1F as white crystals in a yield of 48.7 g.

Moderluten fra den første vask med vann utkrystalliseres (EtOAc/heptan) for å oppnå 21,4 g produkt ID; HPLC: 71,56:25,52. The mother liquor from the first wash with water is crystallized (EtOAc/heptane) to obtain 21.4 g of product ID; HPLC: 71.56:25.52.

Moderluten fra IB og 1C kombineres og omkrystalliseres fra CHCl3/MeOH/heptan for å oppnå 55,7 g produkt 1G som hvite krystaller. The mother liquor from IB and 1C is combined and recrystallized from CHCl 3 /MeOH/heptane to obtain 55.7 g of product 1G as white crystals.

ID omkrystalliseres fra CHCl3/MeOH for å oppnå produkt 1H. ID is recrystallized from CHCl3/MeOH to obtain product 1H.

All moderlut samles, konsentreres og derefter oppløses residuet i varm CHCl3/MeOH 10:1, anbringes på silikagelkolonne og elueres med EtOAc/heksan 40:60. Materialet utkrystalliserer på kolonnen og silikagelen ekstraheres med CHCl3/MeOH og konsentreres. Omkrystallisering av residuet fra CHCl3/heptan 3:1 gir 33,7 g produkt II. All mother liquor is collected, concentrated and then the residue is dissolved in hot CHCl3/MeOH 10:1, placed on a silica gel column and eluted with EtOAc/hexane 40:60. The material crystallizes on the column and the silica gel is extracted with CHCl3/MeOH and concentrated. Recrystallization of the residue from CHCl3/heptane 3:1 yields 33.7 g of product II.

Moderluten fra II omkrystalliseres for å oppnå 18,7 g produkt IK. The mother liquor from II is recrystallized to obtain 18.7 g of product IK.

Moderluten fra IK omkrystalliseres for å oppnå 6,3 g produkt IL. The mother liquor from IK is recrystallized to obtain 6.3 g of product IL.

II, IK og IL samles og omkrystalliseres fra CHCl3/heptan for å oppnå 48 g. II, IK and IL are collected and recrystallized from CHCl 3 /heptane to obtain 48 g.

Den kombinerte moderlut fra II, IK og IL konsentreres for å oppnå 31 g IM. The combined mother liquor from II, IK and IL is concentrated to obtain 31 g of IM.

Produkt 1F tilveiebringer følgende data. Product 1F provides the following data.

Disse data er i overensstemmelse med formelen These data are consistent with the formula

Eksempel 2 Example 2

162 g (0,2 06 M) av de samlede produkter 1F, 1G, 1H og IL fra eksempel 1 suspenderes i 800 ml metanol/THF (5:3). Avkjøles til 0°C og settes til 11,7 g natriummetoksyd. Blandingen omrøres inntil alt er oppløst, og anbringes derefter i fryser natten over. Reaksjonsblandingen får lov å oppnå romtemperatur, stanses med 15 ml HOAc og konsentreres derefter i vakuum ved 40°C for å oppnå det forventede produkt, herunder: 162 g (0.206 M) of the combined products 1F, 1G, 1H and IL from example 1 are suspended in 800 ml of methanol/THF (5:3). Cool to 0°C and add to 11.7 g of sodium methoxide. The mixture is stirred until everything is dissolved, and then placed in the freezer overnight. The reaction mixture is allowed to reach room temperature, quenched with 15 ml of HOAc and then concentrated in vacuo at 40°C to obtain the expected product, including:

Dette produkt settes til 500 ml H20 og ekstraheres to ganger med EtOAc (3 00 ml). De kombinerte ekstrakter vaskes med mettet NaHC03, saltvann og tørres over vannfritt magnesiumsulfat, filtreres og oppløsningsmidlet avdampes. Residuet kromatograferes på silikagel under eluering med EtOAc/heptan (1:4) for å oppnå 109 g farveløs olje som omkrystalliseres fra Et20/heptan for å oppnå: This product is added to 500 mL of H 2 O and extracted twice with EtOAc (300 mL). The combined extracts are washed with saturated NaHCO 3 , brine and dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and the solvent evaporated. The residue is chromatographed on silica gel eluting with EtOAc/heptane (1:4) to obtain 109 g of colorless oil which is recrystallized from Et 2 O/heptane to obtain:

73,9 g første utbytte, hvite krystaller, 73.9 g first yield, white crystals,

8,2 g annet utbytte, hvite krystaller. 8.2 g other yield, white crystals.

Krystallene tilveiebringer følgende data: The crystals provide the following data:

smp. 125-126°C, c*D<20>= 4,23° (1,17 M, CH30H) Disse data er i overensstemmelse med formelen m.p. 125-126°C, c*D<20>= 4.23° (1.17 M, CH3OH) These data are consistent with the formula

Eksempel 3 Example 3

77 ml diisopropylamin oppløses i 250 ml THF i en 2000 ml trehalset kolbe utstyrt med termometer og skilletrakt. Dissolve 77 ml of diisopropylamine in 250 ml of THF in a 2000 ml three-necked flask equipped with a thermometer and separatory funnel.

Reaksjonsblandingen holdes under nitrogen. Blandingen avkjøles til -42°C og settes dråpevis til 200 ml 2,2 M n-butyllitium (i heksan) i løpet av 2 0 minutter og omrøres i 2 0 minutter før 62 ml t-butylacetat oppløst i 200 ml THF tilsettes dråpevis (i løpet av 3 0 minutter). Blandingen omrøres i 3 0 minutter ved - 40°C, derefter tilsettes 140 ml 2,2 M n-butyllitium i løpet av 20 minutter. Når tilsetningen er avsluttet, tilsettes 81 g av produktet fra eksempel 2 i 500 ml absolutt THF så hurtig som mulig uten at temperaturen får stige over -40°C. Omrøring fortsettes i fire timer ved -70°C. Reaksjonsblandingen stanses derefter med 69 ml iseddiksyre og får anta romtemperatur. Blandingen konsentreres i vakuum og residuet tas op i EtOAc, vaskes grundig med vann, derefter mettet NH4C1, NaHC03 (mettet) og til slutt med saltvann. Den organiske fase tørres over vannfritt MgS04, filtreres og oppløsningsmidlet avdampes. NMR av reaksjonsblandingen stemmer overens med utgangsmateriale pluss produkt i ca. ekvivalente mengder pluss noe materiale på grunnlinjen av TLC. Materialet på grunnlinjen av TLC separeres fra utgangsmateriale, og produktet ekstraheres ved syre/base ekstraksjon. Den organiske fase tørres og konsentreres i vakuum for å oppnå 73 g. NMR og TLC stemmer overens med formelen The reaction mixture is kept under nitrogen. The mixture is cooled to -42°C and added dropwise to 200 ml of 2.2 M n-butyllithium (in hexane) over 20 minutes and stirred for 20 minutes before 62 ml of t-butyl acetate dissolved in 200 ml of THF is added dropwise ( within 30 minutes). The mixture is stirred for 30 minutes at -40°C, then 140 ml of 2.2 M n-butyllithium is added over the course of 20 minutes. When the addition is finished, 81 g of the product from example 2 are added to 500 ml of absolute THF as quickly as possible without allowing the temperature to rise above -40°C. Stirring is continued for four hours at -70°C. The reaction mixture is then quenched with 69 ml of glacial acetic acid and allowed to reach room temperature. The mixture is concentrated in vacuo and the residue is taken up in EtOAc, washed thoroughly with water, then saturated NH4Cl, NaHCO3 (saturated) and finally with brine. The organic phase is dried over anhydrous MgSO 4 , filtered and the solvent is evaporated. NMR of the reaction mixture is consistent with starting material plus product in approx. equivalent amounts plus some baseline material by TLC. The material at the baseline of TLC is separated from the starting material, and the product is extracted by acid/base extraction. The organic phase is dried and concentrated in vacuo to obtain 73 g. NMR and TLC agree with the formula

Eksempel 4 Example 4

7 3 g råprodukt fra eksempel 3 oppløses i 500 ml absolutt THF og 120 ml trietylboran tilsettes, efterfulgt av 0,7 g t-butylkarboksylsyre. Blandingen omrøres under tørr atmosfære i 10 minutter, avkjøles til -78°C og 70 ml metanol tilsettes, efterfulgt av 4,5 g natriumborhydrid. Blandingen omrøres igjen ved -78°C i seks timer. Derefter helles den langsomt i en 4:1:1 blanding av is/30% H202/H20. Denne blanding omrøres natten over og får derefter anta romtemperatur. 7 3 g of crude product from example 3 is dissolved in 500 ml of absolute THF and 120 ml of triethylborane is added, followed by 0.7 g of t-butylcarboxylic acid. The mixture is stirred under dry atmosphere for 10 minutes, cooled to -78°C and 70 ml of methanol is added, followed by 4.5 g of sodium borohydride. The mixture is stirred again at -78°C for six hours. It is then slowly poured into a 4:1:1 mixture of ice/30% H202/H20. This mixture is stirred overnight and is then allowed to reach room temperature.

CHC13 (400 ml) tilsettes og blandingen deles. Vannfasen ekstraheres igjen med CHCl^. De organiske ekstrakter kombineres og vaskes grundig med H20 inntil det ikke kan finnes peroksyd. Den organiske fase tørres over MgS04, filtreres og oppløsningsmidlet avdampes. CHCl 3 (400 mL) is added and the mixture is partitioned. The water phase is extracted again with CHCl^. The organic extracts are combined and washed thoroughly with H 2 O until no peroxide can be found. The organic phase is dried over MgSO 4 , filtered and the solvent is evaporated.

Residuet behandles ved lynkromatografi på silikagel, dvs. EtOAc/heksan 1:3 for å oppnå 51 g. The residue is treated by flash chromatography on silica gel, ie EtOAc/hexane 1:3 to obtain 51 g.

Produktet oppløses i THF/MeOH og settes til 100 ml NaOH, derefter omrøres i fire timer ved romtemperatur. Oppløsningen konsentreres ved romtemperatur for å fjerne organisk oppløsningsmiddel, settes til 100 ml H20 og ekstraheres med Et20 to ganger. Den vandige fase gjøres sur med IN HCl og ekstraheres tre ganger med EtOAc. De samlede organiske faser vaskes med H20. Den organiske fase tørres med vannfritt MgS04, filtreres og oppløsningsmidlet avdampes. Residuet tas opp i 2 liter toluen og oppvarmes til tilbakeløpskjøling under anvendelse av en Dean-Stark felle i 10 minutter. The product is dissolved in THF/MeOH and added to 100 ml of NaOH, then stirred for four hours at room temperature. The solution is concentrated at room temperature to remove organic solvent, added to 100 ml H 2 O and extracted with Et 2 O twice. The aqueous phase is acidified with 1N HCl and extracted three times with EtOAc. The combined organic phases are washed with H2O. The organic phase is dried with anhydrous MgSO 4 , filtered and the solvent is evaporated. The residue is taken up in 2 liters of toluene and heated to reflux using a Dean-Stark trap for 10 minutes.

Reaksjonsblandingen får avkjøles til romtemperatur natten over. Tilbakeløpskjøling gjentas i 10 minutter og avkjøling i 24 timer. The reaction mixture is allowed to cool to room temperature overnight. Reflux cooling is repeated for 10 minutes and cooling for 24 hours.

Ovennevnte prosedyre gjentas. Reaksjonsblandingen står ved romtemperatur i 10 dager, og konsentreres derefter for å oppnå 51 g farveløst skum. The above procedure is repeated. The reaction mixture stands at room temperature for 10 days, and is then concentrated to obtain 51 g of a colorless foam.

Dette produkt oppløses i et minimum av CHC13 og kromatograferes på silikagel under eluering med EtOAc/heptan (50:50) for å oppnå 23 g rent materiale. This product is dissolved in a minimum of CHCl 3 and chromatographed on silica gel eluting with EtOAc/heptane (50:50) to obtain 23 g of pure material.

Kromatografi på silikagel i CHCl3/2-propanol (98,5:1,5) gir 13,2 g. Chromatography on silica gel in CHCl3/2-propanol (98.5:1.5) yields 13.2 g.

Eksempel 5 Example 5

Fremstilling av 2R- trans- 5- f4- fluorfenyl)- 2-( 1-metvletvl)- N, 4- difenyl- 1-[ 2 -( tetrahvdro- 4- hvdroksy- 6- okso- 2H-pyran- 2- vl) etyl1- lH- pyrrol- 3- karboksamid Preparation of 2R-trans-5-f4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N,4-diphenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-vl) ) ethyl 1-1H-pyrrole-3-carboxamide

Produktet fra eksempel 4 omkrystalliseres fra EtOAc/heksan. Fraksjon 1 gir 8,20. g 4A. Moderluten gir 4,60 g 4B, HPLC av 4B viser at 100% av produktet er [R-(R*,R*)]isomeren. 4A omkrystalliseres for å oppnå 4,81 g 4C. 4B kromatograferes på silikagel i CHC1_/2-propanol for å 2 3 o oppnå 4,18 g 4D som farveløst skum, som viser = +24,53 (0,53% i CHC13). 4C omkrystalliseres og moderluten fra 4C gir 2,0 g. HPLC indikerer 100% av R-trans-isomeren 2R-trans-5-(4-fluorfenyl)-2-(1- metyletyl)-N,4-difenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroksy-6-okso-2H-pyran-2- yl)etyl]-lH-pyrrol-3-karboksamid. The product from Example 4 is recrystallized from EtOAc/hexane. Fraction 1 gives 8.20. g 4A. The mother liquor gives 4.60 g of 4B, HPLC of 4B shows that 100% of the product is the [R-(R*,R*)]isomer. 4A is recrystallized to obtain 4.81 g of 4C. 4B is chromatographed on silica gel in CHCl_/2-propanol to obtain 4.18 g of 4D as a colorless foam, which shows = +24.53 (0.53% in CHCl 3 ). 4C is recrystallized and the mother liquor from 4C yields 2.0 g. HPLC indicates 100% of the R-trans isomer 2R-trans-5-(4-fluorophenyl)-2-(1-methylethyl)-N,4-diphenyl-1- [2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-1H-pyrrole-3-carboxamide.

Eksempel 6 Example 6

Hydrolyse av kjemisk lakton med formel II Hydrolysis of chemical lactone of formula II

Til en oppløsning av laktonet i THF ved romtemperatur settes en oppløsning av natriumhydroksyd i vann. Blandingen omrøres i to timer, HPLC: 99,65% (produkt), 0,34% (utgangs-lakton). Blandingen fortynnes med 3L vann, ekstraheres med etylacetat (2 x 11) og gjøres sur til pH= 4 ved tilsetning av 37 ml 5N saltsyre. Den vandige fase ekstraheres med 2 x 1,5L porsjoner etylacetat. De kombinerte etylacetatekstrakter vaskes med 2 x 11 vann, saltvann og tørres, og gir efter filtrering etylacetatoppløsningen av den ønskede hovedsyre. Denne oppløsning anvendes direkte i fraksjonen av N-metylglucaminsaltet. A solution of sodium hydroxide in water is added to a solution of the lactone in THF at room temperature. The mixture is stirred for two hours, HPLC: 99.65% (product), 0.34% (starting lactone). The mixture is diluted with 3 L of water, extracted with ethyl acetate (2 x 11) and made acidic to pH= 4 by adding 37 ml of 5N hydrochloric acid. The aqueous phase is extracted with 2 x 1.5 L portions of ethyl acetate. The combined ethyl acetate extracts are washed with 2 x 11 water, brine and dried, and after filtration gives the ethyl acetate solution of the desired main acid. This solution is used directly in the fraction of the N-methylglucamine salt.

Etylacetatekstraktene fra saltvann-vann vasken konsentreres for å oppnå 15,5 g off-white fast stoff. The ethyl acetate extracts from the brine-water wash are concentrated to obtain 15.5 g of off-white solid.

Eksempel 7 Example 7

Kalsiumsalt fra natriumsalt og/ eller lakton Calcium salt from sodium salt and/or lactone

Et mol lakton (54 0,6 g) oppløses i 5 1 MeOH, efter oppløsning tilsettes 11 H20. Under omrøring tilsettes én ekvivalent NaOH og det følges med HPLC inntil 2% eller mindre lakton og metylester av diolsyren er til stede (det kan ikke anvendes overskudd av NaOH, da Ca(OH)2 vil dannes ved tilsetning av CaCl2). Tilsett kaustisk NaOH (51,3 ml, 0,98 ekv.) eller NaOH som tabletter (39,1 g, 0,98 ekv.). One mole of lactone (54 0.6 g) is dissolved in 5 1 MeOH, after dissolution 11 H 2 O is added. While stirring, one equivalent of NaOH is added and it is followed by HPLC until 2% or less of the lactone and methyl ester of the diol acid is present (an excess of NaOH cannot be used, as Ca(OH)2 will be formed when CaCl2 is added). Add caustic NaOH (51.3 mL, 0.98 eq.) or NaOH as tablets (39.1 g, 0.98 eq.).

Ovennevnte prosedyre er vist nedenfor: The above procedure is shown below:

Efter hydrolysen tilsettes 10 1 H20, derefter vaskes minst to ganger med en 1:1 blanding av EtOAc/heksan. Hver vask bør inneholde 10 1 EtOAc/heksan. Hvis natriumsaltet er rent tilsettes 15 1 MeOH. Hvis det er urent og/eller inneholder farve tilsettes 100 g G-60 trekull, og det omrøres i to timer og filtreres over supercel. Vask med 15 1 MeOH. After the hydrolysis, 10 1 H 2 O are added, then washed at least twice with a 1:1 mixture of EtOAc/hexane. Each wash should contain 10 1 EtOAc/hexane. If the sodium salt is pure, add 15 1 MeOH. If it is impure and/or contains colour, 100 g G-60 charcoal is added, and it is stirred for two hours and filtered over supercel. Wash with 15 1 MeOH.

Det utføres en vekt/vol.% på reaksjonsblandingen, ved HPLC for å bestemme den eksakte mengde salt i oppløsningen. 1 ekv. eller et lite overskudd CaCl2<*>2H20 oppløses i 20 1 H20. Både reaksjonsblandingen og CaCl2 oppløsningen oppvarmes til 60°C. CaCl2 tilsettes langsomt under kraftig omrystning. Efter endt tilsetning avkjøles langsomt til 15 C og filtreres. Filterkaken vaskes med 5 1 H20. Tørring ved 50°C i vakuumovn. A weight/vol.% is performed on the reaction mixture by HPLC to determine the exact amount of salt in the solution. 1 eq. or a small excess of CaCl2<*>2H20 is dissolved in 20 1 H20. Both the reaction mixture and the CaCl2 solution are heated to 60°C. CaCl2 is added slowly with vigorous shaking. After the addition is complete, cool slowly to 15 C and filter. The filter cake is washed with 5 1 H20. Drying at 50°C in a vacuum oven.

Filterkaken kan omkrystalliseres ved oppløsning i 4 EtOAc (50°C), filtrering over supercel, vask med 1 1 EtOAc, og derefter tilsettes 3 1 heksan til 50°C oppløsningen. The filter cake can be recrystallized by dissolving in 4 EtOAc (50°C), filtering over supercell, washing with 1 1 EtOAc, and then adding 3 1 hexane to the 50°C solution.

Ovennevnte prosedyre er vist nedenfor: The above procedure is shown below:

Eksempel 8 Example 8

Behandling av etvlacetatoppløsningen av den fri syre med formel I med N- metylglucamin Treatment of the ethyl acetate solution of the free acid of formula I with N-methylglucamine

Til en oppløsning av den frie syre med formel I (0,106 M) i etylacetat (3 1) settes en oppløsning av N-metylglucamin (20,3 g, 0,106 M) i (1:1) vann-aceton (120 ml, 120 ml) under kraftig omrøring ved romtemperatur. Omrøring fortsettes i 16 timer og den uklare oppløsning konsentreres i vakuum til "250 ml. Toluen (1 1) tilsettes og blandingen konsentreres til et hvitt fast stoff "100 g. Det faste stoffet oppløses i 1670 ml aceton og filtreres i en trehalset kolbe utstyrt med en mekanisk rører og termostat-kontrollert termometer. Kolben og filteret vaskes med 115 ml (1:1) vann-aceton og den klare oppløsning avkjøles langsomt. Dette tilveiebringer et bunnfall som oppløses påny ved oppvarmning til 65°C. Tilsetning av ytterligere 2 0 ml vann efterfulgt av vaskning gir et krystallinsk produkt som isoleres ved filtrering. Det faste stoffet vaskes med 1200 ml CH3C1 og vakuumtørres ved 255°C for å oppnå et hvitt fast stoff. Analyse av dette materiale indikerer at det inneholder 4% amin samt 0,4% rest-aceton og 0,67% vann. Analytiske resultater er som angitt nedenfor: To a solution of the free acid of formula I (0.106 M) in ethyl acetate (3 1) is added a solution of N-methylglucamine (20.3 g, 0.106 M) in (1:1) water-acetone (120 ml, 120 ml) under vigorous stirring at room temperature. Stirring is continued for 16 hours and the cloudy solution is concentrated in vacuo to "250 mL. Toluene (1 1) is added and the mixture is concentrated to a white solid "100 g. The solid is dissolved in 1670 mL of acetone and filtered into a three-necked flask equipped with a mechanical stirrer and thermostat-controlled thermometer. The flask and filter are washed with 115 ml (1:1) water-acetone and the clear solution is cooled slowly. This provides a precipitate which redissolves on heating to 65°C. Addition of a further 20 ml of water followed by washing gives a crystalline product which is isolated by filtration. The solid is washed with 1200 mL of CH 3 Cl and vacuum dried at 255°C to obtain a white solid. Analysis of this material indicates that it contains 4% amine as well as 0.4% residual acetone and 0.67% water. Analytical results are as indicated below:

Smeltepunkt: 105-155°C (dekomponering) Melting point: 105-155°C (decomposition)

Forventet analyse: C= 63,73, H= 6,95, N= 5,57, F2=9,53 Funnet analyse: C= 62,10, H= 6,89, N= 5,34, F2 Expected analysis: C= 63.73, H= 6.95, N= 5.57, F2=9.53 Found analysis: C= 62.10, H= 6.89, N= 5.34, F2

C= 61,92, H= 7,02, N= 5,38, F2 C= 61.92, H= 7.02, N= 5.38, F2

H20 = 0,47% (KF) H20 = 0.47% (KF)

HPLC: MeOH, H20, THF (40, 550, 250) HPLC: MeOH, H 2 O, THF (40, 550, 250)

Econosil: C18, 5^, 25 CM Econosil: C18, 5^, 25 CM

256 nm: 1,0 ml/min. 256 nm: 1.0 ml/min.

6-81 min.: 98,76% 6-81 min.: 98.76%

Opt. Ret.: [a]<*>b= -10,33° (c= 1,00, MeOH) Opt. Ret.: [a]<*>b= -10.33° (c= 1.00, MeOH)

Rest oppløsningsmiddel: CH2CH= 0,26% Residual solvent: CH2CH= 0.26%

Titreringer: HC104 (0,1 N) = 203,8% Titrations: HC104 (0.1 N) = 203.8%

Bu4N0H (0,1 N) = 98,5% Bu4N0H (0.1 N) = 98.5%

Andre salter som kan fremstilles analogt med fremgangs-måtene hensiktsmessig valgt blant eksempel 7 og 8 ovenfor kan være kaliumsaltet, hemimagnesiumsaltet, hemisinksaltet eller l-deoksy-2-(metylamino)-D-glucitolkomplekset av forbindelsen med formel I. Other salts which can be prepared analogously to the methods suitably chosen from examples 7 and 8 above can be the potassium salt, the hemmagnesium salt, the hemisinc salt or the 1-deoxy-2-(methylamino)-D-glucitol complex of the compound of formula I.